GelGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝膠染料
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
FS0370-500UL | GelGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝膠染料 | 500µl | 520.00 |
核酸凝膠染料(核酸純化與電泳) 核酸凝膠染料(核酸純化與電泳)
產(chǎn)品描述
GelGreen是一種*的油性大分子,不能穿透細胞膜進入細胞內,不易揮發(fā)升華,人體不會吸入。艾姆斯氏測試結果也表明GelGreen在凝膠染色濃度下*沒有誘變性,因此相對于EB的強致癌性是一種安全無毒的核酸染料。適用于各種大小片段核酸的電泳染色,對核酸遷移率的影響遠小于SYBR Green I。適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠,室溫下在酸或者堿性緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強。
GelGreen適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA、ssDNA以及RNA染色,可以選擇膠染法或泡染法進行染色,使用非常方便和靈活。同SYBR Green I的光譜性質,適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠成像透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。
1)此方法比較節(jié)省染料,500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
2)由于GelGreen 具有良好的熱穩(wěn)定性,可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將GelGreen儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。
3)GelGreen兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
4)如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
5)膠染法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
運輸與保存方法
室溫運輸。4 ºC穩(wěn)定保存12個月,避免強光直射。
使用方法
一、膠染法(同EB,電泳前染色)
1 制膠時加入GelGreen核酸染料(每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL GelGreen 10,000×水溶液,以此類推)。
2 按照常規(guī)方法進行電泳。
注意事項
二、泡染法(電泳后染色)
1)按照常規(guī)方法進行電泳。
2)用H2O將GelGreen 10,000×水溶液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(如將15μL GelGreen10,000×水溶液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
3)將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,**染色時間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5~10% 聚丙烯酰胺的凝膠,染色時間通常介于30min到1h,并隨聚丙烯酰胺含量增加而延長。
注意事項
1)用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
2)3×YeaGreen染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
幾種核酸染料比較:
名稱 | 靈敏度 | 穩(wěn)定性 | 對DNA遷移的影響 | 安全性 | 適用性 |
GelRed | 高 | 高 | 條帶不彎曲,DNA片段不遷移 | ① 是一種*的油性大分子,不易揮發(fā)升華,不易吸入人體,不能穿透細胞膜進入活體細胞內,安全無毒。 | 通用大小片段電泳染色,與EB有相同的光譜特性,無需改變?yōu)V光片及觀察裝置。標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在300nm紫外光附近可得到**激發(fā)。 |
② 艾姆斯氏測試結果表明,GelRed在凝膠染色濃度下*沒有誘變性,因此*沒有致癌毒性。 | |||||
GelGreen | 高 | 高 | 條帶不彎曲,DNA片段不遷移 | ① 是一種*的油性大分子,不易揮發(fā)升華,不易吸入人體,不能穿透細胞膜進入活體細胞內,安全無毒。 | 通用大小片段電泳染色,適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 |
② 艾姆斯氏測試結果表明,DuGreen在凝膠染色濃度下*沒有誘變性,因此*沒有致癌毒性。 | |||||
SYBR Green I | 高 | 低 | 染料濃度較高時,條帶容易彎曲,DNA片段遷移的現(xiàn)象明顯 | 屬花箐染料,能透過細胞膜進入活體細胞內,但容易生物降解,不會在體內殘留,安全無毒。 | 100bp以上電泳染色,適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 |
EB | 低 | 高 | 條帶不彎曲,DNA片段不遷移 | ① 分子量小,易揮發(fā)升華,易吸入人體,不易生物降解,在體內長期殘留。 | 100bp以上電泳染色,背景熒光信號高;使用普通紫外凝膠透射儀觀察。 |
② 艾姆斯氏測試結果表明,EB容易引起有機體突變,是一種強誘變劑,具有高致癌性。 | |||||
Goldview | 低 | 高 | 條帶不彎曲,DNA片段不遷移 | ① 主要成分為吖啶橙,是一種煤焦油提取物,具有高毒,致癌,高誘變性。 | 100bp以上電泳染色,背景熒光信號高;適用于使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 |
② 易揮發(fā)升華,易吸入人體,能穿透細胞膜進入活體細胞內,不易生物降解,在體內長期殘留。 |
特別提醒:
● 如果您使用的是紫外成像儀,請選擇GelRed;如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測,請選擇 GelGreen。
● 在極少數(shù)情況下,質粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會出現(xiàn)拖尾和分辨率降低,此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。
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